摘自《运动员机能评定》冯连世、李开刚主编
人体肌肉活检资料证明,反复大强度运动有引起运动性肌肉
损伤(EIMI)。EIMI间接表现为:1.肌肉疼痛:一般称为延迟性肌肉酸痛症(DOMS);2血清酶活性升高和血清肌红蛋白含量增高。
人体大多数酶是存在于各类组织细胞内,并在细胞内发挥其催化功能;还有一些存在于血液中的酶,被称为血浆酶或血清酶。
血清酶分为功能性和非功能性两类。前者在血浆中发挥重要的催化功能,后者则活性较低,在血浆中无重要催化功能。正常情况下,外分泌腺的酶来自肝脏、心脏、骨骼肌、肾脏等组织细胞的酶类随细胞更新或破坏,而释放入血,成为非功能性酶的基本来源。这些酶类主要包括肌酸激酶、乳酸脱氢酶、谷草转氨酶、谷丙转氨酶等。
血清酶的去路主要有发下几条:1.在血管内为蛋白酶所降解;2随尿排出体外;3被肝脏清除掉。正常安静情况下,血清酶的来源和去路处于动态平衡状态,因为它们的活性相对稳定,在正常范围内变动。当机体遭受强烈激烈,例如激烈运动时,血清酶活性就会出现相应的变化。
运动引起血清酶活性增高的原因,主要因为运动牵拉使细胞膜通透性增加,儿茶酚胺类物质释放增多,或组织细胞
损伤等,引起酶从细胞漏出进入血液增多。
测定血清酶活性是评定身体机能的重要手段。在大运动量训练后,血清酶活性通常会升高,而后又逐渐恢复正常。训练后血清酶活性升高的幅度与恢复的快慢,可反映运动强度和训练量的大小以及身体的适应情况。此外,血清酶活性也能反映组织的损伤和修复情况,可以帮助诊断运动
损伤性疾病。
本章要主对血清肌酸激酶及其同工酶、血清浮酸脱氢酶、血清天门冬氨酸氨基移换酶、血清丙氨酸氨基转移酶的测定及应用进行介绍。
一、血清肌酸激酶(CK)的测定
简介:肌酸激酶,又称磷酸肌酸激酶。在代谢过程中它催化肌酸和ATP或磷酸肌酸和ADP之间的转化。
肌酸激酶酶偶联试剂盒法
原理: CK可使磷酸肌酸和ADP转变成肌酸和ATP,ATP提供高能磷酸键,在己糖激酶偶联下,促使葡萄糖转变成6-磷酸-葡萄糖酸,后者再以6-磷酸-葡萄糖酸脱氢酶为指标酶,与NADP+反应生成NADPH。如除CK外,基质、葡萄糖、NADP+及两个工具酶的浓度均足够而适当,则NADPH生成的速度与CK的活力成正比,可在40nm测定NADPH生成速度而计算CK的活力。
测试仪器
测试食品可采用全自动生化分析仪或半自动化生化分析仪,视食品型号的不同,分别按照不同的测试要求设定仪器的相关参数:
温度(摄氏度) 25,30,37
波长 340nm
比色杯光径 1cm
延迟时间 2min(最低1min)
反应时间 2min(最低1min)
测试样本的采集
测试样本要求为新鲜无溶血血清,肝素抗凝血浆或EDTA血浆,可选取静脉血、耳垂或指尖末端血;采集全血后离心出血清(最好不少于10微升)。
测试试剂盒的试剂成分与浓度 测试试剂盒内有RI和RII两种试剂瓶,RI瓶内为白色粉末状固体,RII瓶内为无色透明液体。
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测试步骤 以半自动生化分析仪的测试方法举例说明
(1) 取一定量RII复溶一瓶RI,溶解后即为工作液。工作液预先混合均匀,保温至测试温度。
(2) 按照1:50的比例吸取一定量的被测样品血清,放入工作液中,混合均匀,如血清吸取10微升,则加入500微升工作液中进行反应,混合均匀,在25摄氏度温育3.5min,或在30摄氏度温育2.5min,或在37摄氏度温育1min后,读取初始光度,然后在精确1、2、3min时分别读取吸光度,精确每min平均吸光度,确定每min吸光度变化。
运动员与普通人群存在很大的差异,且个体差异也很大,可根据不同的运动项目和不同的个体分别进行监控。男运动员的参考值范围一般为10~300U/L,女运动员的参考值范围一般在10~200U/L。